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血液/循環(huán)核酸提取方案

更新時(shí)間:2020-05-06瀏覽:2495次

每當(dāng)聽(tīng)到要提取血液樣本的核酸

你是不是也和我一樣有一種一臉懵的感覺(jué)?

是哪種物種的血?

(哺乳動(dòng)物,禽類,還是兩棲類?)

是什么類型的樣本?

(新鮮血液,血凝塊,凍存血,干血斑,血清血漿…)

樣本體積多大?

如何選擇提取方法?

……

血液/循環(huán)核酸提取方案

馬上告訴你答案!

 

血液核酸提取方案

樣本特點(diǎn): 

材料成分復(fù)雜:血液樣本中包含紅細(xì)胞、白細(xì)胞、蛋白質(zhì)、血小板等,提取時(shí)要保證裂解充分的同時(shí)去除無(wú)關(guān)雜質(zhì)。

樣本保存:

新鮮血液可直接收集于抗凝血管,保存于-20℃。大體積血液,可先裂紅,將收集到的白細(xì)胞-20℃保存,保存效果更加。

血液中RNA在室溫兩小時(shí)即會(huì)被降解,選擇新鮮血液進(jìn)行提取

。如有需長(zhǎng)期保存,建議選擇RNA穩(wěn)定劑RNALock 血液RNA穩(wěn)定劑 (DP440,TIANGEN)進(jìn)行處理,處理后的血液可在常溫保存2天,4℃保存1周,-20℃度保存半年。

小體積(200μl)血液DNA提取方案:

大體積(0.25-5ml)血液DNA提取方案:

血液RNA提取方案:

干血斑核酸提取方案

 

樣本特點(diǎn)

紙片吸附血液樣本有限,充分裂解后進(jìn)行離心,需要盡可能提高提取得率和純度。

樣本保存

常溫保存

干血斑DNA提取方案

 循環(huán)核酸提取方案

樣本特點(diǎn)

循環(huán)核酸在血清/血漿等體液中的含量很低,在腫瘤等疾病分析中樣品珍貴,對(duì)提取得率要求很高。

樣本保存

用于提取循環(huán)核酸的血清、血漿樣本,應(yīng)使用可以穩(wěn)定樣本中白細(xì)胞的血液保存管進(jìn)行儲(chǔ)存,盡可能減少在保存過(guò)程中因白細(xì)胞破裂釋放基因組DNA,干擾循環(huán)核酸提取及下游檢測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

循環(huán)核酸DNA提取方案

 

 

 

 

 

 

 

 

 

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